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英諾思EasyIso™人naïve CD4 T細胞分離試劑盒(SN3104):20分鐘解鎖96.8%高純度細胞分選

更新時間:2025-05-26點擊次數:311
  英諾思EasyIso™人naïve CD4 T細胞分離試劑盒(SN3104):20分鐘解鎖96.8%高純度細胞分選
  在免疫學研究和細胞治療領域,精準獲取高純度naïve CD4 T細胞是攻克自身免疫疾病、優化CAR-T療法的關鍵。英諾思EasyIso™人naïve CD4 T細胞分離試劑盒(貨號SN3104)憑借無柱磁極分選技術和陰性篩選策略,實現從PBMC中快速分離目標細胞,為科研與臨床提供高效解決方案。
  一、技術原理:陰性分選保障細胞活性
  本試劑盒采用生物素-鏈霉親和素磁珠偶聯系統,通過三步精準標記實現高效分離:
  1.靶向標記非目標細胞:生物素偶聯抗體特異性結合CD8?T細胞、B細胞、單核細胞等非naïve CD4 T細胞表面標志物
  2.磁珠高效捕獲:鏈霉親和素納米磁珠(40 nm粒徑)與標記細胞結合,形成磁性復合物
  3.無柱磁極快速分離:通過磁力架吸附非目標細胞,未標記的CD45RA?CD45RO?naïve CD4 T細胞直接富集于上清液
  技術優勢:
  ?避免抗體與目標細胞接觸,維持天然細胞狀態
  ?納米磁珠減少機械損傷,細胞活性**>95%**
  ?全程無需分選柱,降低樣本損失風險
  二、標準化操作流程(18-20分鐘完成)
  1.PBMC預處理
  采用密度梯度離心法獲取PBMC,調整濃度至1×10?cells/mL,70μm濾網過濾去除團塊
  2.抗體孵育(10分鐘)
  按100μL/mL比例加入分離雞尾酒,常溫孵育10分鐘,標記非目標細胞
  3.磁珠偶聯(5分鐘)
  震蕩激活鏈霉親和素納米磁珠30秒,以100μL/mL加入樣本,輕柔混勻后靜置
  4.體積擴展與磁分選
  1.流式管體系:補加FACS Buffer至2.5 mL
  2.離心管體系:補加至7.5 mL
  垂直置于磁力架吸附(單孔3分鐘/聯排5分鐘),傾倒上清即獲目標細胞
  三、性能驗證與核心數據
  經流式細胞術驗證(圖B):
  ?分選前:PBMC中CD4?T細胞占比31%,其中naïve亞群僅43%
  ?分選后:
  ?CD4?T細胞純度97.1%
  ?CD45RA?CD45RO?naïve亞群純度96.8%
  ?細胞得率≥85%(與樣本質量相關)
  關鍵質控提示:
  •使用含2%FBS的專用FACS Buffer,避免滲透壓波動
  •嚴格無菌操作,確保細胞培養兼容性
  •建議搭配聯排磁力架處理多樣本
  四、三大應用場景推薦
  1.免疫機制研究:分離后的naïve CD4 T細胞可直接用于:
  (1)TCR信號通路分析
  (2)Th細胞分化動態追蹤
  (3)單細胞轉錄組測序建庫
  2.細胞治療開發:
  (1)CAR-T療法中naïve T細胞的優先選用
  (2)腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)擴增前分選
  3.疾病模型構建:
  (1)自身免疫疾病過繼轉移模型
  (2)HIV潛伏感染機制研究
  為何選擇SN3104?
  •時間成本銳減:比流式分選快6倍,較傳統磁珠分選省30%操作步驟
  •成本效益突出:單次處理量達1×10?細胞(SN3104L規格),適合大規模實驗
  •數據可重復性高:經多中心驗證,批間差<5%
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